蜂胶的提取与纯化

蜂胶原胶中含有大量重金属成分(如铅、汞等),如提取不当,会对人体造成严重伤害,甚至死亡。所以蜂胶的提纯技术对于蜂胶的品质至关重要。又由于蜂胶中的有效成分种类丰富、性质各异,而黄酮类化合物所占比重较大,因此,往往以黄酮类化合物的含量多少来表征蜂胶提取效率的高低。

蜂胶的提取

目前,提取蜂胶的方法很多,如常用有热水提取法、碱液提取法、丙酮提取法、乙酸乙酯提取法、醇提取法、酶解法、超临界法等,但都有其各自的弊端。蜂胶中黄酮类化合物的提取主要根据溶解性及酸性进行,黄酮苷及游离的黄酮均能溶于醇,通过醇的多次浸泡,可以较充分地把蜂胶中的黄酮类物质提取出来。为此,国内外用于药品和食品的蜂胶,大部分还是采用乙醇作提取溶剂。用乙醇提取蜂胶目前仍是一种方便安全且经济有效的方法。但国内外研究表明,用乙醇提取,提取时间长,导致在一定温度下黄酮类醇溶功能物质受到不同程度破坏。因此,现在多数蜂胶提取研究都采用超声辅助醇提法,同时也有关于微波-超声辅助醇提法的研究报道。

薛晓丽[1]比较了乙醇提取、索氏提取、超声波提取、超临界流体提取等4种提取工艺的粗提取物中总黄酮含量,结果表明,不同提取工艺对蜂胶中黄酮类物质的提取有较大的影响。蜂胶中黄酮类物质的最佳提取工艺是超声波提取法。该方法是超临界流体提取工艺的8倍,比最常用的乙醇浸出法高出15%,与索氏提取工艺的黄酮类物质含量相近。乙醇浸出法、索氏提取法、超声波提取法、超临界流体法等4种方法是提取蜂胶中黄酮类物质的基本方法,每种方法各有利弊。乙醇浸出法工艺简单、实验可重复性强、实验条件易控制,更加适用于工厂的大量生产,但实验时间、生产周期长。索氏提取法设备简单、节约溶剂、大大缩短了实验时间,但实验过程需在加热条件下进行,不利于部分受热易分解的黄酮类物质的提取。超临界流体法提取的总黄酮含量偏低、设备昂贵、实验条件不易控制、临界压力和温度的微小变化就导致实验结果大大不同,该方法不适用于黄酮类物质的提取,更不适用于蜂胶化学成分的分析。相比之下,超声波提取法实验设备价格合理、提取时间短、总黄酮含量较高,更加适用于蜂胶中黄酮类物质的实验室提取及少量生产提取。

根据叶静凌[2],夏道宗[3]等人的研究,探索并总结出了超声辅助醇提法的最佳提取工艺条件。其原理主要是利用超声波在液体中的空化作用加速植物有效成分的浸出。研究表明,影响蜂胶总黄酮提取效率的主要因素是提取时间,其次是乙醇浓度,提取温度和料液比对提取效率几乎无影响;超声波提取具有短时高效的优点,适合于蜂胶总黄酮的提取;正交试验表明,超声条件下蜂胶总黄酮的最佳提取工艺是30℃、超声时间50min,95% 乙醇为溶剂、料液比1:30,此条件下测得总黄酮百分含量为6.39%。唐坤[4]等人将微波技术与超声技术结合,探索出了微波-超声辅助醇提法,具有反应高效性和强选择性等特点,而且具有操作简便、副产物少、提取率高等优点。Beatriz C.B.S. Mello[5]等人研究了运用乙醇提取,结合纳米过滤的方法提取蜂胶中的黄酮以及酚类物质,取得了良好的效果。

但是总结近些年来的文献也发现,在对于蜂胶活性物质,特别是总黄酮或者总酚提取方面,往往会出现多种“最优条件”的组合,这是由于所关注的提取重点不同引起的。又由于蜂胶中活性物质众多,不同的检测水平、对照物条件下,即使相同的提取条件,所取得的提取效果差异也会很大。

蜂胶的纯化

蜂胶经过初步提取后,其中的活性物质含量有所提高,但是并不能达到很高的纯度,特别是将蜂胶应用于保健品或者医药品以及成分检测时。因此有效地对提取的蜂胶进行纯化也是蜂胶加工过程中的重要环节。近些年来,应用较多的是梯度洗脱-柱层析法[6]。

参考文献

[1]薛晓丽. 提取工艺对蜂胶总黄酮含量的影响. 吉林农业科技学院学报,2007,16(3): 3-4.

[2]叶静凌. 超声技术在蜂胶提取上的应用研究. 蜜蜂杂志,2008,5:7-9.

[3]夏道宗. 蜂胶总黄酮的最佳提取工艺研究. 食品科学,2005,26(1):153-157.

[4]唐坤,李标,蔡应繁,夏晨燕. 微波-超声波提取蜂胶的工艺研究.食品研究与开发,2008,29(10):74-77.

[6]梁巧楣. 蜂胶总黄酮的制备及含量测定. 中国现代医学杂志,2007,17(17):2123-2126.

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