蜂胶生物学功能研究进展

在西方国家,蜂胶被誉为“紫色黄金”,国内外专家学者对蜂胶的生物学作用、 药理生理功能等进行了大量的研究。

抗病原微生物作用

1. 蜂胶的抗菌作用及机理

对蜂胶及其有效成分的抗菌作用研究比较早,已证明对金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、副伤寒沙门氏菌、上呼吸道感染菌等20余种致病性细菌具有抑制作用。

蜂胶的醇提取液和单体均能起到抑菌作用,尤其对食品致病菌的抑制作用更为明显,其最小抑菌浓度分别为副伤寒沙门氏 菌0.8%,志贺氏菌0.8%,魏氏梭菌0.8%,肉毒梭菌 0.4%,蜡样芽 孢杆菌 0.1%,小结肠炎尔森氏菌 0.4%,金黄色葡萄球菌0.4%。

蜂胶醇提取液对致病菌如变形链球菌和乳酸杆菌均有抑制作用。蜂 胶醇提取液浓度为600μg/ml 时,能显著降低链霉素和青霉素的最小抑菌浓度,产生明显的抑制金 黄色葡萄球菌作用。与强力霉素、 氯霉素、头孢菌素、多粘菌素B等也有一定的协同作用,与氨苄青霉素的协同作用不明显。不同产地的蜂胶有效成分差别很大,但抗菌作用机理基本相同。

近年来对蜂胶抗菌作用研究多侧重于抗菌机理,并取得了一定进展。Park Yk等发现,蜂胶醇提液可以抑制乳酸球菌的葡萄糖基转移酶的活性,阻止齿斑葡聚糖的形成,从而达到对口腔微生物的毒杀作用。蜂胶还能破坏细胞膜和细胞浆有序形态,引起部分溶菌和细菌蛋白质合成的抑制。德国学者认为蜂胶水提物的重要成分咖啡酸能抑制细菌二氢叶酸还原酶的活性,这可能是蜂胶具有“非甾体抗炎药”特征原因之一。蜂胶还能增加实验动物血清总蛋白的合成,改善补体的成分,增强吞噬细胞的吞噬功能,提高机体抵抗病菌侵袭的能力。

2. 抗病毒作用

蜂胶中的黄酮类化合物和 3- 甲基 -丁烯 -2- 咖啡酸酯对单纯性疱疹病毒 ( HSV-1)、腺病毒 -5、 流感病毒、轮状病毒、口腔炎病毒 等均有灭活作用,尤其对 HSV-1 作用尤为明显。3- 甲基 - 丁烯 -2- 咖啡酸酯能使 HSV-1 病毒效价降低,病毒DNA合成能力为原来的1/32。黄酮醇的活性较强,黄酮类较弱,高良姜素、山奈粉、槲皮素对病毒的灭活作用依次减弱,黄酮醇和黄酮并用时的作用比单用时更强,表示各种成分协同作用是蜂胶抗病毒活性强于各单体的主要原因。

对蜂胶乙酸乙酯提取物六种肉桂酸类化合物进行体内外试验表明,其中的阿魏酸异戊酯能显著抑制流感病毒H3N3的感染性和产生血凝素的能力。试验还表明,在培养基中加入上述六中提取物时,病毒的复制受到最大的抑制。病毒转型变异和DNA分析实验表明,蜂胶提取物能选择性的抑制腺病毒与对鼠胚胎成纤维细胞的转克隆并呈量效关系,低浓度时虽能抑制病毒的生长,但不能抑制基因的表达。

近期研究表明,蜂胶还可以通过免疫反应系统来抑制 HIV-1 病毒的表达,首先用 一定浓度的蜂胶溶液处理 CEM 细 胞,随后用 HIV-1 病毒感染细胞, 当蜂胶浓度为 4.5μg/ml 时,可以破坏合体细胞的形成,在低浓度时可抑制合体细胞的形成,进 一步研究表明,蜂胶还可以抑制 P24 抗原的产生,最大抑制率达 90%~100%。

蜂胶保护肝脏的作用

1. 蜂胶提取物对四氯化碳致肝脏损伤的保护作用

四氯化碳可致动物肝脏发生病变,动物摄入一定量的四氯化 碳后,肝脏的生化指标改变和组织发生病变。近年来研究表明, 蜂胶对四氯化碳致动物肝脏损伤有明显的保护作用。MahranLG等人研究发现,预先将不同浓度的水溶性蜂胶与肝细胞温浴30min, 再用四氯化碳处理30min,然后分析肝细胞乳酸脱氢酶的释放、脂质过氧化物的形成以及细胞间还 原型谷胱苷肽的减少等指标,结果表明,蜂胶呈剂量依赖性地保护肝细胞的损伤,其机理可能是 蜂胶水提取液含有一种抗氧化剂和自由基清除剂,可以帮助肝细胞维持一定的还原型谷胱苷肽。

组织病理学的研究表明,古巴红蜂胶不仅可以降低四氯化碳引起鼠肝脏三酰甘油浓度的升高和降低血清转氨酶的活性,而且可以显著减少肝脏脂肪变性区气囊变 化的数量。Sharmam等人给大鼠每天饲喂四氯化碳、花生油为1∶1的溶液0.1ml/kg,二十天后,大鼠 血清转氨酶、丙氨酸转氨酶、天 冬氨酸转氨酶活性明显升高;血 液和组织的谷胱苷肽含量明显下降;血液和肝组织脂质过氧化物含量升高。当饲喂 100mg/kg蜂胶后,各项生化指标显著改善,肝脂质过氧化水平也显著下降。结果表明,蜂胶对四氯化碳致鼠肝损伤有显著的保护作用。

2. 蜂胶对酒精致肝脏损伤的保护

作用 Lin-S-C 等人研究发现,蜂胶对酒精造成的肝损伤也有保护作用。每天在对照组大鼠的饲料中加 入 3.125ml 99.5% 的酒精,连续 4周造成肝损伤,血清转氨酶和甘油三脂显著升高,并有脂肪肝出现。如果在饲喂酒精前喂给大鼠不同剂量的蜂胶醇提取液,结果发现, 给药浓度为 10mg/kg 体重时,血清转氨酶和甘油三脂水平显著降低 (p<0.001)。组织病理学进一步分析表明,当蜂胶供给量为 30mg/kg 体 重时,蜂胶组大鼠肝脂肪变质程度明显降低。蜂胶对慢性酒精中毒致鼠肝微粒体酶的活性也有显著的影响,供给 30mg/kg 体重的蜂胶可以防止总细胞色素 P-450 酶, 依赖 NADPH 的细胞色素还原酶,7- 乙氧基四氯羟基化以及肝脂质过氧化物的升高,而100mg/kg 体重的蜂胶则可以诱导 γ- 谷氨酰半胱氨酰合成酶和谷氨酰 -S- 转 移酶的产生,降低肝中谷胱甘肽的含量。

3. 蜂胶对D-半乳糖胺诱导肝损伤的保护作用

应用透射电子显微镜技术和 生化分析技术研究发现,古巴红蜂胶对1000mg/kg 半乳糖胺诱导的鼠肝炎有保护作用。当蜂胶供给量 为 10 ~ 100mg/kg 体重,可以明显 防止半乳糖胺诱导的肝细胞的改变,逆转血清丙氨酸转氨酶活性和丙二醛浓度的升高。SugimotoY等人的研究也证明,蜂胶提取物对 D- 半乳糖胺致肝损伤有很好的保 护作用,改善病变大鼠血清天冬氨酸转氨酶的活性。

近年来研究发现,蜂胶水提取物中的有机酸化合物也具有护肝的作用,Basnet P 从蜂胶中分离出五种奎尼酸的衍生物,其中有四种被证明对四氯化碳和 D- 半乳糖胺致大鼠肝脏损伤有保护作用 , 它们分别是 : ① 甲 基 3,4- 二 -O- 咖啡酰奎尼酸;② 3,4- 二 -O- 咖啡酰奎尼酸;③ 甲 基 -4,5- 二 -O- 咖 啡 酰 奎 尼 酸;④ 3,5- 二 -O- 咖啡酰奎尼酸。

综上所述,蜂胶对化学物质致动物肝损伤有保护作用,这种保护作用不是蜂胶多种活性成分协同作用的结果。

免疫调节作用

通过对大小白鼠、豚鼠、家兔、 猪、牛犊的试验表明,应用蜂胶或配合抗原引入机体,能增强机体的免疫功能。

鼠体外试验和不同给药途径的体内试验表明,蜂胶水提取物对血中两种补体水平 ( 补体经典途径和补体选择途径 ) 均有显著作用,作用程度因给药途径和补体来源不同而有一定的差别。水提物还能抑制补体参与的溶血过程,且与温度和时间相关,高浓度时对薄红细胞有直接损害作用。

蜂胶水提取物对酵母多糖引起的急性炎症反应也有一定的影响,其作用程度与给药途径密切相关。蜂胶水提取物还能增加宿主对革兰氏阴性病原菌 ( 如致病大肠 杆菌、肺炎克氏杆菌、普通变形 杆菌、假单孢杆菌 ) 的抵抗作用,尽管水提物在体外对上述致病菌 无抑制作用,但是它可以引导宿主产生非特异性保护。体内试验表明,蜂胶水提物可以激活巨噬细胞,以保护宿主受病原微生物的入侵。

蜂胶还被用于制作家畜的免疫剂,用蜂胶作免疫佐剂比用皂素作佐剂的大白鼠的淋巴结浆细胞增生强 3.7~6 倍,其血清凝集素滴度高 3.7~ 4 倍。用相当于蜂胶干物质 2.4mg 的蜂胶乙醇提取液饲喂体重 1kg 的家兔,丙种球蛋白增长迅速,从而对抵御疾病产生着直接作用。蜂胶还作为破伤风类毒素免疫过程中增长非特异性和特异性免疫因子的刺激剂。

研究表明,蜂胶能有效地增强人体的免疫力,促进吞噬细胞的作用,刺激身体产生抗体,抵抗多种疾病。

蜂胶的抗氧化作用

研究巴西蜂胶的水提物、甲醇提取物和氯仿提取物均有清除 1,1-Ciphenyl-2-picryhydrazyl 自由基和 O2 自由基,Basnetp 等人从巴西的蜂胶水提取物中分离一种苯基丙烯酸衍生物的化合物,其抗氧化作用强于 VC 和 VE。

德国学者 Volpert R 在研究蜂胶消炎药和烧伤药时发现,蜂胶的水提取物对心肌黄嘌呤和黄嘌呤氧化酶催化的氧化反应均有抑制作用,对吲哚乙酸的过氧化物也有抑制作用,其抗氧化作用可能与其中所含的单酚和多酚化合物有关。

化学发光法研究表明,两种古巴蜂胶醇提取物对黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶产生的超氧阴离子均有捕获能 力。5μg/ml 或 9.5μg/ml 浓度时对超氧阴离子自由基的抑 制 率 为 50%,与 72μg/mlSOD 或 0.15μg/ml儿茶素等效。对烷氧自由基的半数捕获程度为 0.6μg/ml, 与 0.11μg/ml 维生素 E 等效。

蜂胶醇提取物对鲁咪诺 -H2O2 产生的化学发光也有抑制作用,这可能与其中所含的黄酮化合物有关。蜂胶水提取物还可以保护纤维细胞免受高压氧的协迫,这可能是蜂胶水提取物具有抗炎作用的机理。蜂胶中的活性物质咖啡酸苯乙酯还是脂氧化酶的水竞争性抑制剂,当 CAPE 浓度为 10μmol/L 时,它可以阻断人体中性白细胞和黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶体系产生的活性氧。

蜂胶对心血管的作用

蜂胶中含有大量的黄酮、黄酮醇等物质,对心血管系统有一定的改善作用。用蜂胶为主要原料开发的蜂胶营养液,通过饲喂高血脂大鼠的实验,结果可显著抑制和降 低血液 TG 和 TC 的含量,升高高密度脂蛋白的水平,且高、中、低 的剂量组与对照组均有显著差异。Chopra等报道,实验动物静脉注射阿霉素10mg/kg造成非心肌炎病 模型后,在腹腔注射 50 和 100mg/ kg 蜂胶,能显著降低血清肌酸酶、 天冬氨转氨酶的活性以及血液和肌肉组织中 GSH 和硫代巴吡妥生成物的含量,并与芦丁进行了比 较,表明蜂胶对阿霉素诱导的心肌毒性有保护作用。

本文刊登在《中国蜂业》杂志,参考文献略。

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