蜂胶对肝、肾损伤的保护作用

目的：探究蜂胶乙醇提取物对顺铂所致肝、肾损伤的干预作用。方法：采用不同剂量（50、100、150mg/kgmb）的蜂胶乙醇提取物对大鼠进行灌胃，连续7d给药后单次腹腔注射10mg/kgmb的顺铂建立肝、肾损伤模型，之后再灌胃5d。实验结束后通过测定血清中肝、肾损伤的标志物，肝、肾组织中脂质过氧化物、抗氧化物的含量以及观察肝、肾组织病理学的改变来探究蜂胶对顺铂毒性的干预作用。

结果：与模型组相比，高剂量组大鼠血清中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的活力，尿素氮、肌酐含量均有降低；肝、肾组织中超氧化物歧化酶、过氧化氢酶的活力，还原型谷胱甘肽的含量均有升高；丙二醛、诱导型一氧化氮合酶含量均有降低；从组织病理学方面来看，模型组的肝、肾组织都出现了病变，表现为肝小叶细胞坏死，肾小球细胞脱落、空泡性等，蜂胶给药组这些病变情况均有不同程度的降低。结论：蜂胶乙醇提取物可以降低体内的氧化应激程度，提高机体自身抗氧化能力，从而很好地降低顺铂造成的肝、肾损伤。

顺铂由于其抗癌谱广、作用强且可以和多种抗肿瘤药物一同作用的特点，是目前最常用的抗肿瘤药物之一。但由于顺铂对细胞杀伤不具有特异性，因此在使用顺铂治疗癌症的同时也会对正常细胞造成损伤，产生较强的毒副作用，这大大限制了顺铂在临床上的运用。研究表明顺铂造成机体损伤的主要机制之一是氧化应激作用，表现为顺铂可以降低抗氧化酶的活力，诱导脂质过氧化物产生。一些国内外学者曾研究了藏红花素、灯盏花素、咖啡酸苯乙酯、蜂王浆、槲皮素、VC、VE等天然或人工合成的抗氧化剂对顺铂造成的损伤的保护作用，结果表明这些抗氧化剂可以很好地减少顺铂造成的损伤。

蜂胶是一种具有芳香气味和黏性的胶状固体物质，在很久以前就已作为民间药物使用。蜂胶具有很好的抗氧化、抗癌、抗菌、抗炎、保肝等生物学活性和药理活性。尤其是抗氧化活性，近年来国内外学者就蜂胶的抗氧化活性做了广泛的研究，发现蜂胶能有效清除自由基，缓解机体的氧化应激。咖啡酸苯乙酯、槲皮素被认为是蜂胶中的主要活性成分，蜂胶的许多生物活性均认为与这些成分有关。Kus和Almaghrabi等分别研究了咖啡酸苯乙酯、槲皮素等成分对顺铂毒性的干预作用，发现这些物质可以有效干预顺铂所致的损伤。

顺铂是目前最常用的抗肿瘤药物之一，可以通过抑制癌细胞的DNA复制过程、损伤细胞膜结构达到抗癌的作用，临床上将其用于治疗卵巢癌、睾丸癌、前列腺癌、肺癌等多种实体肿瘤。但使用顺铂治疗癌症的同时也会对正常细胞造成损伤产生较强的毒副作用，对肝、肾、耳乃至神经都会造成损伤。

由于顺铂会对肝、肾造成一定程度的损伤，因此用AST、ALT、BUN、Cr这些临床上判断肝、肾是否正常的指标来研究蜂胶对顺铂毒性的降低作用。AST和ALT是最常用于诊断肝细胞受损的指标，它们的升高是肝细胞受损的重要标志。BUN、Cr是判断肾功能的常用指标，分别具有很高的敏感性和特异性，其值的高低可准确反映肾功能的和损害程度，对于肾功能损伤早期诊断、治疗和预后具有重要意义。实验结果表明，相比于对照组，模型组AST、ALT、BUN、Cr这些指标均显著提高，说明顺铂对大鼠的肝、肾造成了一定程度的损伤。而相比于模型组，蜂胶给药组的这些指标均显著性降低，说明蜂胶提取物可以有效降低顺铂造成的肝、肾损伤。

此外，从肝、肾的组织病理学方面来看，相比于对照组，模型组的肝、肾组织都出现了病变情况，具体表现为肝小叶细胞坏死，肾小球细胞脱落、空泡性，肝、肾病理学切片中均发现炎性细胞浸润等情况。而蜂胶给药组的这些病变情况均有不同程度降低。由此可知，对大鼠给药蜂胶提取物可以有效降低由于顺铂造成的肝、肾损伤。

研究表明氧化应激是顺铂毒性的主要机制之一，活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）介导的氧化应激在顺铂毒性中具有重要的作用。一旦顺铂进入细胞内，会使DNA和蛋白质发生损伤，生成过量的ROS，导致生物膜正常功能被破坏。顺铂能与抗氧化系统相互作用，影响抗氧化系统和抗氧化酶系，导致不同组织发生氧化损伤，氧化应激反应程度和组织结构损耗的轻重呈明显的正相关。

正常情况下，机体内产生的自由基会被细胞内的抗氧化酶如SOD、CAT清除，从而保证机体内自由基的生成和清除达到平衡。当机体内自由基积累过多，不能及时被抗氧化酶类清除时，就会破坏自由基与机体防御系统之间的平衡，从而促进脂质过氧化过程，引起细胞损伤。脂质过氧化过程的主要产物是MDA，因此组织中MDA的含量可以一定程度上反映机体脂质过氧化的程度，也间接表明机体内自由基与抗氧化防御系统的平衡情况。

iNOS参与体内NO的合成，当机体处于氧化应激状态时iNOS的表达量增加，导致过量的NO生成，过量的NO容易引起脂质过氧化。GSH、SOD、CAT是机体抵御自由基的重要防线，在清除自由基、维持机体内自由基平衡、防止氧化应激和清除脂质过氧化物积累等方面起着重要作用。组织中这些酶的活力可作为衡量抗氧化能力的指标。研究表明顺铂可以降低大鼠肝脏、肾脏中GSH的含量，抑制SOD、CAT等酶的活力，从而使脂质过氧化产物积累引起机体损伤。

由于蜂胶具有很好的抗氧化作用，可作为天然的抗氧化剂使用，故本实验从抗氧化角度研究其对顺铂造成肝、肾损伤的干预作用。实验结果表明，在腹腔注射顺铂之后，与对照组相比，顺铂可引起肝脏、肾脏的氧化损伤造成脂质过氧化物的大量产生，降低体内抗氧化酶的活力，这与LiChengzhen和Kart等的实验结论相一致。给药蜂胶之后，肝、肾组织中MDA、iNOS较模型组有明显的降低，GSH的含量、CAT、SOD等酶的活力均有显著性提高，说明蜂胶可以通过降低顺铂造成的氧化损伤，从而降低顺铂对肝、肾的损伤。

综上所述，本研究从提高机体抗氧化能力、降低体内氧化应激等角度，表明蜂胶可以有效地降低顺铂造成的肝、肾毒性。但是具体的作用机制还不清楚，有待于从分子角度更进一步进行研究。本研究为临床上找到一种可以降低顺铂造成肝、肾损伤的药物和食品，也扩宽了蜂胶的应用范围，为蜂胶的综合开发利用提供了实验依据。

（来源：《食品科学》2018年 第15期 | 黄海波 沈圳煌 耿倩倩 史培颖 吴珍红 孙燕如 韩鸣凤 缪晓青 ）