蜂王浆蛋白体对胃癌细胞具有抑制作用

蜂王浆别名蜂乳、蜂皇浆。近些年有大量的研究报告表明，蜂王浆具有多种生物活性，如抗肿瘤、抗氧化、增强记忆力、调节免疫力、抗菌、修复组织损伤等。目前大部分学者主要研究蜂王浆的整体功效，而对于某些成分的具体功效报道较少。蛋白质是生物生长发育所需的必需营养素，蜂王浆蛋白是蜂王浆的主要成分，而蜂王浆的重要医疗保健作用和生物学功能，如抗肿瘤、抗氧化、抗菌等，与其中的蜂王浆蛋白密切相关。

胃癌是临床上威胁国人健康最常见的消化系统恶性肿瘤之一，发病率位于所有肿瘤的第六位，病死率处于第四位，严重威胁着人类健康。在食品领域，已有采用黑加仑、绿豆、猕猴桃、细香葱提取物等多种天然产物来探究其对胃癌细胞的影响，经过对比，发现蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞SGC-7901的抑制作用要高于黑加仑提取物以及猕猴桃根黄酮提取物，但抑制能力低于霍山石斛蛋白。

以蜂王浆蛋白为原料，采用体外消化模拟实验，制备蜂王浆蛋白体外消化物。通过细胞学形态观察和集落形成实验，发现蜂王浆蛋白体外消化产物对肾上皮细胞293T的形态没有造成影响，而对胃癌细胞SGC-7901的形态和集落形成能力具有明显抑制效果。通过MTT实验发现，蜂王浆蛋白体外消化物对SGC-7901的生长增殖确实具有明显的抑制作用，且具有时间、剂量依赖性，与王勇姿通过实验得出对肝癌细胞增殖影响一致。

采用流式细胞术检测细胞周期及凋亡过程中，发现经蜂王浆蛋白体外消化产物诱导后，胃癌细胞SGC-7901中G1期比例升高，S期比例降低，DNA合成期受阻，引发细胞凋亡增多，与陈立军通过实验得出蜂王浆在体内抑制肿瘤的机制与其促进肿瘤组织坏死和细胞凋亡有关的结论一致。p53蛋白也被称作基因组的守护者，当DNA发生损伤时，p53蛋白具有修复损伤DNA的重要作用，是一种抑制肿瘤的基因。PARP是聚腺苷二磷酸核糖聚合酶家族中的一员,其催化活性约占家族酶活性的90%以上，在多种癌细胞和组织中呈现出高表达。

实验中，蜂王浆蛋白体外消化产物显著上调了SGC-7901细胞中p53的蛋白表达，同时下调了PARP-1蛋白的表达，且蛋白表达水平与蜂王浆浓度相关。将蜂王浆蛋白进行体外消化模拟实验，测定其最终水解度为28.8±1.42%，消化率为71.32±3.3%；对酶解后的消化产物进行SDS-PAGE电泳分析，发现其蛋白均由之前的大分子蛋白，水解成了蛋白分子量为10-15kDa甚至更小的小分子蛋白。

集落形成实验以及MTT实验发现，与空白对照组相比，蜂王浆蛋白体外消化产物对胃癌细胞具有抑制作用（P＜0.05），并呈现时间-剂量效应。并在0.2mg/mL浓度干预48h后，其抑制率最高达到62.84±2.54%；并且经过蜂王浆蛋白体外消化产物干预后的胃癌细胞，呈现密度减少、形态皱缩的现象；流式细胞术检测其经蜂王浆蛋白体外消化产物诱导后，胃癌细胞SGC-7901中G1期比例升高，S期比例降低，DNA合成期受阻，引发细胞凋亡增多；WesternBlot法发现蜂王浆蛋白体外消化产物显著上调了SGC-7901细胞中p53的蛋白表达，同时下调了PARP-1蛋白的表达（P＜0.05），且蛋白表达水平与蜂王浆浓度相关。

（来源：王天石 - 《锦州医科大学》 - 2019）