蜂胶在酒精所致肝损伤中的肝保护效果

酒精性肝病是影响公众健康的一项重要疾病。在酒精所导致的肝损伤中，自由基所介导的氧化应激起着主导性作用，同时，一系列促炎症细胞因子的产生又促使了肝功能异常 。中国蜂胶富含黄酮类物质，是一种天然的抗氧化剂，蜂胶中存在的多种黄酮化合物在消除肝细胞炎症、防止肝脏纤维化、保护和修复肝细胞方面具有显著的肝保护作用。不过，蜂胶在酒精所致肝损伤中的肝保护效果及其相关的机制目前尚未见报导。

以中国蜂胶的乙醇提取为研究对象，在C57BJ/6L小鼠上通过连续灌胃8周酒精诱导肝损伤，一方面在灌胃酒精的同时结合灌胃蜂胶乙醇提取物，观察蜂胶对酒精所致肝损伤的干预效果;另一方面，在连续灌胃8周酒精之后，通过继续灌胃4周蜂胶乙醇提取物来评价其对酒精所致肝损伤的治疗效果。实验小鼠分为:饲喂高脂日粮并连续灌胃8周酒精的处理组A、饲喂高脂日粮并连续灌胃8周酒精和蜂胶乙醇提取物的处理组。

灌胃用酒精为55°红星二锅头，灌胃剂量前两周分别为每天每公斤体重4mL和6mL，从第三周开始保持在每天每公斤体重8mL直至第八周结束;处理组B在每天灌胃酒精的同时，灌胃10mL每公斤体重的蜂胶乙醇提取物。八周之后，对来自处理组A和处理组B的12只小鼠，分别采集血液样本及肝组织样本。

同时，剩余的处理组A的小鼠，转为饲喂常规全价颗粒饲料 ，随机分成处理组A1和处理组A2两个亚组，继续饲喂4周。其中，处理组A1为自然恢复组;处理组A2则每天持续灌胃10mL每公斤体重的蜂胶乙醇提取物直至第12周结，同样采集小鼠的血液及肝组织样本。通过测定血清和肝组织中甘油三和胆固的含量、血清中的转氨酶水平、观察肝脏组织冰冻切片，评价蜂胶乙醇提取物对酒精所致肝损伤的保护效果。

同时，利用转录组测序技术分析酒精处理组A以及蜂胶乙醇提取物干预之间肝组织中差异表达的基因，鉴定蜂胶乙醇提取物干预作用下，肝组织中差异表达的功能基因及其所在生物学过程，揭示蜂胶乙醇提取物对酒精所致肝损伤的肝保护作用可能的途径及机制。主要研究结果如下:

1)利用GC-MS在蜂胶乙醇提取物中鉴定出黄酮类、脂肪酸及芳香酸类、醇类等共24种物质，其中总黄酮含量为20.7%。

2)蜂胶乙醇提取物干预小鼠血清以及肝组织中的TG和TC含量 显著低于灌胃酒精的处理组A;蜂胶乙醇提取物治疗小鼠血清及肝组织中的TG和TC含量显著低于自然恢复。

3)蜂胶乙醇提取物干预小鼠血清中的天门冬氨酸转氨酶 和丙氨酸转氨酶水平显著低于灌胃酒精的处理组A;蜂胶乙醇提取物治疗小鼠血清中的天门冬氨酸转氨酶和丙氨酸转氨酶水平显著低于自然恢复。

4)肝脏冰冻切片的结果显示，蜂胶乙醇提取物干预小鼠肝细胞中的脂肪积聚显著低于处理组A的小鼠。

5)肝组织转录组测序结果显示，蜂胶乙醇提取物能够抑制雌性以及雄性小鼠肝脏中，有关脂类合成的基因的表达，减缓脂肪的积聚;在雌性小鼠中，蜂胶乙醇提取物还能显著抑制细胞因子及其受体相互作用路径中基因的表达，从而缓解肝脏炎症。

6)处理组A和处理组B肝脏组织中Idi1、Cyp51、Fabp5和G6pc荧光定量实验的结果显示，其表达量水平变化趋势与转录组的测序结果相一致。 研究结果表明，蜂胶乙醇提取物能够有效地缓解由于酒精摄入所导致的、血清和肝脏中TG、TC含量的上升，降低血清中反映肝脏损伤程度的转氨酶的水平，并通过下调肝组织中与脂类合成相关的基因的表达，减少脂肪的积聚，缓解脂肪肝的形成。

（来源：蜂胶乙醇提取物对小鼠酒精性脂肪肝保护作用的研究；丁蒙蒙；扬州大学 硕士学位论文）