蜂胶中黄酮类化合物最新研究进展

摘要:近年来研究蜂胶的化学成分,尤其是来自热带地区的蜂胶化学成分已成为国外蜂胶研究的热点。蜂胶的化学成分主要包括黄酮类化合物,芳香酸与芳香酸酯、醛与酮类化合物、脂肪酸与脂肪酸脂、萜类化合物、甾体化合物、氮基酸、糖类化合物、烃类化合物、醇和酚类及其它化合物。本文主要综述了蜂胶化学成分中黄酮类化合物的最新研究进展。

关键词：蜂胶   黄酮类化合物

蜂胶是由蜜蜂将采自植物的枝条、叶芽及愈伤组织等的分泌物与上腭腺、蜡腺等的分泌物同少量花粉混合后所形成的黏性物质。蜂胶是一种天然活性物质，具有十分广泛的生物学作用，成为近年来国内保健食品领域研究的一个热点。黄酮类化合物是一类在植物界广泛分布的酚性组分, 目前已知的黄酮类化合物单体已8000 多种，具有2-苯基色原酮结构的化合物。它们分子中有一个酮式羰基，第一位上的氧原子具碱性，能与强酸成盐，其羟基衍生物多具黄色，故又称黄碱素或黄酮。

黄酮类化合物在植物体中通常与糖结合成苷类，小部分以游离态（苷元）的形式存在。绝大多数植物体内都含有黄酮类化合物，它在植物的生长、发育、开花、结果以及抗菌防病等方起着重要的作用。[1]

1、蜂胶中黄酮类化合物

1.1 蜂胶中黄酮类化合物的组成

世界各地蜂胶样品中分离出来的黄酮类化合物已有70 多种。蜂胶中黄酮类化合物主要包括黄烷酮、黄酮醇类、双氢黄酮类。其中黄烷酮主要有白杨素、杨芽黄素、芹菜素、刺槐素、木犀草素、柳穿鱼素、蜜橘黄素、福橘黄素等;黄酮醇类主要包括槲皮素、芦丁、山奈素、鼠李素、良姜素、高良姜素等;双氢黄酮类主要有乔松素、樱花素、柚皮素等。[2]

1.2 蜂胶中黄酮类化合物的生理功能
蜂胶中黄酮类化合物具有抗炎、抗过敏、抗致癌、抗增生、抗风湿、抗病毒和抗细胞增生等作用,对降血脂、预防动脉粥样硬化、皮肤病、妇科疾病、慢性前列腺炎、扩张冠状动脉、治疗恶性肿瘤以及糖尿病等都有疗效。黄酮类化合物可用来防治以下疾病:毛细血管的脆性和出血、牙龈出血、眼视网膜出血、脑内出血、肾出血、静脉曲张、栓塞、痔、溃疡以及因接触性运动而产生的挫伤和糖尿病视网膜病,以及喷雾治疗哮喘病等。

1.3 蜂胶中黄酮类化合物的生物学活性

1.3.1 抗氧化活性

黄酮类化合物中抗氧化作用的主要有效成份是酚羟基,其中B - o - di - OH 对清除超氧阴离子自由基和羟自由基、抑制脂质过氧化是第一位的,而3 - OH、5 - OH、4 - 羰基的主要作用是抑制油脂自动氧化。[3]抗氧化剂清除自由基, 依其作用的性质通常分为两大类: 第一类为预防性抗氧化剂。这一类抗氧化剂可以清除链引发阶段的自由基, 如SOD、CA T 等酶以及金属离子络合剂等; 第二类抗氧化剂是断链型抗氧化剂, 可以捕捉自由基反应链中的过氧自由基, 阻止或减缓自由基链反应的进行。众多实验研究表明, 黄酮类物质在抗氧化反应中不仅能清除链引发阶段的自由基, 而且可以直接捕获自由基反应链中的自由基, 阻断自由基链反应, 起到预防和断链双重作用。

1.3.2 抗肿瘤活性

黄酮类化合物的抗肿瘤机制多种多样，如槲皮素的抗肿瘤活性与其抗氧化作用、抑制相关酶的活性、降低肿瘤细胞耐药性、诱导肿瘤细胞凋亡及雌激素样作用等有关；蜂胶黄酮类化合物中皂草黄素、桑黄素和儿茶精可明显抑制肿瘤细胞的生长, 槲皮酮可触发癌细胞凋亡,类黄酮可把未分化的恶性肿瘤细胞转变成分化的正常成熟细胞;萜烯类化合物和咖啡酸类化合物可使癌细胞停留在DNA 合成阶段, 改变细胞的无休止生长性状。[4]

1.3.3 抗菌抗病毒作用

黄酮类抗病毒的机理主要是抑制溶酶体H+- ATP 酶,磷酸酯酶A 2 的脱壳作用,影响病毒转移基因的磷酸化,抑制病毒和RNA 的合成。

1.3.4 调节毛细血管的脆性与渗透性,保护心血管系统

毛细血管破损是Vc 缺乏病(坏血病) 的一个特征,Vc 在维持毛细血管的健康方面十分重要。由于黄酮类化合物与Vc 在自然界总是同时存在,并有协同作用,故可推测它们的功能是共同加强毛细血管,调节其渗透性,防止毛细血管与结缔组织的内出血破裂,共同建立一个抗传染病的保护屏障。

2、蜂胶中黄酮类化合物的提取

蜂胶易溶于乙醚、丙酮、乙酸乙酯和乙醇等有机化合物中。提取效果依次为丙酮>95%的乙醇>乙酸乙酯>乙醚。[5]但丙酮价格高，乙醚毒性较大，乙酸乙酯有刺激性气味，而乙醇因来源广、价格便宜、容易回收等特点而被广泛使用，但不同条件下乙醇对黄酮的提取效果不同。最佳提取纯化工艺条件为：乙醇浓度为60%，液固比为18ml/ g，水浴温度为55℃，水浴时间为5h，上述工艺条件下，黄酮纯度为72.2%。最优树脂为D101，吸附速度为1.0ml/ min，洗脱剂先采用40%乙醇2BV体积洗脱洗去杂质，再用80%乙醇5BV体积洗脱获得黄酮成分，此条件下层析得到的蜂胶黄酮纯度90.2%。近年来，CO2超临界萃取已用于蜂胶的提取，萃取物纯净，色泽金黄，共鉴定出23个组分，但抗菌效果没有乙醇提取蜂胶显著。[6]

3、蜂胶中黄酮类化合物分析方法

黄酮类化合物的分析技术包括分光光度法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、毛细管电泳法以及色谱技术联用等。紫外分光光度法具有重复性好、准确、简便、易掌握和不需要复杂仪器设备等优点，是最常规的分析方法。该方法可以确定蜂胶中总酚或总类黄酮，总二氢黄酮或二氢黄酮醇，总黄酮或黄酮醇。薄层色谱（TLC）分离和定性分析类黄酮，具有分离速度快、效率高、操作简便的优点，因此广泛应用于分离、鉴定类黄酮。高效液相色谱（HPLC）法是目前最流行最可靠的类黄酮化合物的分析方法。近年来，指纹图谱技术已成为国际公认的控制中药或天然药物质量的最有效的手段，也引起了蜂胶研究者的广泛关注。目前，HPLC指纹图谱已用于蜂胶的真假鉴定[7]，以及不同地理来源蜂胶的相关性研究。

4、黄酮类化合物研究展望

大量研究表明，蜂胶中黄酮类化合物具有抗菌、抗癌、抗老化等作用，是蜂胶的生理活性成分，然而，蜂胶中黄酮类化合物成分和含量因产地和采集季节的不同而不同；相同的样品用不同方法提取出来的成分有差异，发挥的作用也不相同。而且，虽然关于黄酮类化合物的作用已有很多报道，但它们在体内的作用还不太清楚，因此，对不同来源、不同方法提取的蜂胶中得成分及其在体内的作用机理，将会成为今后蜂胶研究工作的热点，也是科学开发和利用蜂胶的关键。中国幅员辽阔，蜂群量多，胶源丰富，将为蜂胶的进一步研究提供坚实的基础。

黄酮类化合物的生物活性与其特殊的分子构型、构象有关。目前已有一些学者开始利用生物合成或化学合成的方法得到具有特殊结构的黄酮类化合物, 这也是黄酮类化合物研究的一个方面。与合成方法相比, 从植物中分离纯化某些特定的黄酮类化合物, 难度大, 得率低, 成本高, 如利用有机合成的方法对一些已被证明具有重要应用价值的黄酮类进行人工合成, 是非常有意义的工作。

参考文献：

[1]Vassya S , Bankova V. Propolis :Recent advances in chemistry and plant origin. [J ]Apidologie , 2000 , 31 :3 -15.

[2]胡春. 黄酮类化合物在不同氧化体系中的抗氧化作用的研究[J ] . 食品与工业酵,1996 , (3) :46 -53.

[3]冯建新.蜂胶的抗肿瘤作用[J].养生专题

[4]付英娟，张建新，李晓龙.蜂胶提取物对菜籽油抗氧化性的研究[J].中国油脂，2006（8）：55-57.

[5]曹炜，符军放，索志荣，等.蜂胶中白杨素和高良姜素的HPLC分析 [J] .药物分析杂志，2007（4）：522-524

[6]周平,章征天,胡福良等.蜂胶HPLC指纹图谱真伪初探[J].养蜂杂志,2005(8): 5-6.