蜂胶,除具有调节免疫、抗氧化、抗疲劳、抗癌、抗菌等生物学和药理学作用外,还具有良好的抑菌作用,但其抑菌作用机理还尚未报道。一般认为,天然抗菌物质的抗菌机理分为两大类:(1)破坏菌体结构,作用于细胞壁、原生质膜及细胞内容物;(2)影响代谢作用与生理活动,对酶体系作用,抑制呼吸作用,影响病原菌有丝分裂。
1、蜂胶提取物的抑菌作用
梁郁强等利用提纯的蜂胶药液、新西兰蜂胶药液和30%乙醇溶液进行体外抑菌试验表明,蜂胶对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌有明显的抑制作用。
Sato T等研究了蜂胶对引起胃癌的幽门螺杆菌的作用,发现蜂胶能杀死幽门螺杆菌,抑制脲酶活性,促进胃液分泌,减少胃病发生。
张天宝等将蜂胶乙醇液按照加水稀释后对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌作用15分钟,杀灭率均为100%,按1:2加水稀释对白色念珠菌作用20分钟,杀灭率为99.96%,99.98%。
曾莉萍采用琼脂平板扩散法对河南蜂胶抑制金黄色葡萄球菌进行了研究,发现随p H增加,河南蜂胶对金黄色葡萄球菌的抑菌活性呈阶段性减弱。随浓度降低,对金黄色葡萄球菌的抑菌活力减弱,在p H6.5下,产生抑菌环的最小浓度为0.1 2 4 2 %( 即实验剂量为8.4 7μg ) ,证实河南蜂胶对金黄色葡萄球菌有明显的抑菌活性。还证实对丙型链球菌无明显的抑菌活性,对甲型链球菌和乙型链球菌有明显的抑菌环活性,抑菌活性随pH增加和浓度降低而减弱。
陈志宝等人研究了蜂胶对金黄色葡萄球菌毒力因子的抑制作用,发现蜂胶能够抑制标准菌株ATCC29213的生长,在低浓度时抑菌作用较弱,虽然亚抑菌浓度的蜂胶不能完全抑制金葡菌生长,但却能够抑制金葡菌的多种毒力因子的分泌。蜂胶对α-溶血素的分泌抑制作用最强,且在较宽浓度范围都能明显降低α-溶血素的分泌。
杨明等人以乙醇浸出提取的蜂胶和CO2超临界萃取提取的蜂胶为材料,测定了两种蜂胶的效果和最低抑菌浓度。结果表明:两种蜂胶对大肠埃希氏杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、白念珠菌和紫色癣菌都有一定抑菌效果,最低抑菌浓度为1.54~3.08 mg/mL。
申慧亭等人采用琼脂挖沟法与琼脂绝对浓度法,对20种临床常见的病原菌和条件致病菌(金黄色葡萄球菌、链球菌、绿脓杆菌,结核杆菌、肺炎球菌、伤寒杆菌、甲型副伤寒杆菌、丙型副伤寒杆菌、白色葡萄球菌、大肠杆菌、变形杆菌等)都有抑制生长的作用,对结核杆菌、白色念珠菌,新型隐球菌进行了实验室条件下的蜂胶抗菌活性研究。结论:蜂胶在体外实验条件下有明显的抗细菌、抗真菌以及抗结核分枝杆菌的作用,而且这种作用不受实验方法的影响。
表1 琼脂绝对浓度法蜂胶对20种细菌与真菌抗菌结果记录
兰桃芳等人:采用水、9 5 %乙醇及与超声波的综合作用从原蜂胶中提取蜂胶液,将得到的蜂胶提取液稀释成0.8%、0.4 %、0.2%、0.1 %,并分别对蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、黑曲霉五种菌进行抑菌圈直径和最小抑制浓度( MIC) 的测定。结果表明,超声波作用于9 5 %的乙醇蜂胶液的方法提取效果最好,提取率为27. 3%。不同提取方法得到的蜂胶提取液的抑菌作用存在差异,以超声波和乙醇提取的蜂胶液对受试菌作用最强。蜂胶提取液对大肠杆菌的抑制作用最强。其次是沙门氏菌和蜡样芽孢杆菌,最差的是黑曲霉。
有关资料表明,蜂胶中抗菌物质主要为黄酮类物质和树脂,这些物质大部分为脂溶性,经有机溶剂提取的蜂胶液抑菌效果比较好。该研究通过对蜂胶中活性物质的提取和抗菌作用观察初步表明,经HPLC法检测89%乙醇提取的蜂胶粗提物出现多个峰值,即检测到多种化合物,其中黄酮峰值较高,经计算含量为20. 1%,其它化合物还有待进一步定性检测。孟日增等人利用体外抑菌试验考察了蜂胶粗提物对金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌的抑菌效果,结果均呈高敏。据文献报道,蜂胶除了能抑制金黄色葡萄球菌、链球菌、大肠杆菌外,还能抑制蜡样芽孢杆菌、沙门氏菌、黑曲霉。
陈志宝等人研究表明,蜂胶能够抑制标准菌株ATCC29213的生长,在低浓度时抑菌作用较弱,虽然亚抑菌浓度的蜂胶不能完全抑制金葡菌生长,但却能够抑制金葡菌的多种毒力因子的分泌。蜂胶对α-溶血素的分泌抑制作用最强,且在较宽浓度范围都能明显降低α-溶血素的分泌。
2、蜂胶提取物的抑菌机理
周先汉等人研究了蜂胶提取物的抑菌活性及其抑菌机理。较低的pH值有利于蜂胶发挥抑菌作用;温度高于常温时,蜂胶的抑菌活性有所降低,但在常规的杀菌温度范围内,仍有较好的抑菌效果且较为稳定;金属离子对蜂胶的抑菌效果影响不大。
蜂胶对细菌细胞壁与细胞膜都有一定的作用,使其通透性增加,造成细胞内物质外流,破坏了细胞正常代谢的物质基础,从而达到了抑菌效果。
3、蜂胶提取物抑菌成分稳定性研究
孟良玉等人以蜡样芽孢杆菌为指示菌研究蜂胶提取物抑菌成分的稳定性。结果表明:蜂胶提取物具有较强的抑菌活性,对热处理、pH值、紫外线、金属离子均具有较好的稳定性,仅在121℃或pH10处理后其抑菌活性才明显下降。
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