蜂胶对主要致龋菌的体外抑菌实验报告

【摘要】本文用蜂胶对变形链球菌、乳酸杆菌进行了体外抑菌实验，测定了蜂胶的最低抑菌浓度，并与金银花、厚朴、黄边等七种有抗菌作用的中药进行了对照。结果表明，蜂胶的抑菌作用明显优于对照组，在龋病的防治上有较高的开发价值。

【作者】 杨更森  侯晓薇  冯玲淑  靳占兵  郭兰英

【关键词】蜂胶 致龋菌 抑菌

蜂胶制剂用于治疗口腔溃疡已有报道，但对龋病防治的研究尚未见报道，我们用蜂胶对主要致龋菌进行了体外抑菌实验测定了其最低抑菌浓度，并与金银花、厚朴、黄连等七味中药进行了对照实验，现将实验情况报告如下。

材料与方法

一、细菌：变形链球菌，由首都医科大学口腔医学院微生物研究室提供。乳酸杆菌，由河北医科大学微生物研究室提供。

二、蜂胶：由河北省永年县临铭关蜜蜂养殖场提供。

三、蜂胶提纯方法：将天然蜂胶100g加工成颗粒状，放入棕色广口瓶内，加入60％乙醇500ml浸泡，将瓶子放于背光处，每日振荡四次，10天后用纱布过滤，过滤液进行乙醇、水回收。实验时用60％乙醇稀释。

四、对照组中药:所用中药均由石家庄市医药公司购进。黄芪，黄芩：产地为河北省;大黄：产地为湖北省；黄连，厚朴：产地为四川省；连翘：产地为山西省；金银花：产地为山东省。

五、中药水提溶液的制备：以上7种中药，各取50g，放入500ml蒸馏水中浸泡30分钟，然后在玻璃容器内加热煮沸，保持微沸30分钟，搅拌后趁热过滤，药渣再加蒸馏水250ml,同上法煎煮后过滤，两次过滤液合并后浓缩至100ml，高压灭菌后放入-10℃冰箱内备用。

六、实验药物稀释方法：按1:2梯度逐级稀释1倍，即由100％～50％～25％……1.5625％。

七、浸药滤纸片的制备：将普通滤纸剪成直径为7mm的圆片在各级浓度的药液中浸透备用。

八、体外抑菌实验方法：本实验采用纸片扩散法，肉汤琼脂培养基熔化后，倾注入平皿制备平板，待其凝固后将培养好的标准菌株变形链球菌、乳酸杆菌菌液，以无菌棉拭浸均匀划线接种于备好的肉汤琼脂平板上，待其干燥数分钟后，用无菌镊子在琼脂表面旋转蜂胶和中药各级浓度的浸药滤纸片，轻压纸片，使其与琼脂适当接触，各纸片间距相等。在37℃恒温箱内孵育24小时，然后用抑菌圈读数测量器测量每一个抑菌圈直径。每味药每个浓度作5份标本，作统计学处理。

结果

一、蜂胶与对照组对变形链球菌的抑菌圈及乳酸杆菌的抑菌圈见表1、2。

七种中药与相同浓度的蜂胶抑菌试验的结果显示,蜂胶的平均抑菌环明显大于其他七种中药,经统计学检验,最小的t值大于3.36,ｐ值均小于0.01,在统计学上有显著意义。

二、最低抑菌浓度：变形链球菌：蜂胶为1.5625％；黄芪为3.125％；厚朴、黄芩、黄连、大黄、连翘、金银花为6.25％。乳酸杆菌：蜂胶为1.5625％；黄芪、金银花为0；厚朴、黄芩、黄连为6.25％；大黄、连翘为3.125％。

讨论

蜂胶是蜜蜂在筑巢酿蜜过程中分泌的一种粘状物质，主要由工蜂的上腭腺分泌物及植物中的树胶、树脂以及蜂蜡等物质混合而成。蜂胶有广泛的生物学和药物学作用,其抗菌谱非常广泛,早在1948年Kivalkina就报道了蜂胶在肉汤培养基中对溶血性链球菌、枯草杆菌等12种细菌的抑菌作用，1967年Lindenfelser报告了蜂胶乙醇提取液对39种细菌有较强的抑菌作用^[1]。近年来，利用蜂胶的抗炎、促进组织再生等作用治疗口腔溃疡、牙周病已取得较好的临床效果^[2],但对龋病防治的研究应用尚未见报道,一些有抗菌作用的中草药如厚朴、黄连、黄芩等对致龋菌有一定的抑菌作用,因技术或疗效的原因而未能广泛用于临床。本组实验表明，蜂胶对龋病的主要致龋菌变形链球菌、乳酸杆菌有较强的抑菌作用，其最低抑菌浓度明显低于中药对照组。蜂胶除含有广谱抗菌的黄酮外,还含有人体必需的氨基酸和微量元素^[3]，无毒副作用,来源广,提取工艺简单,对防治龋病药物的开发有较高的价值。

参考文献：

[1] 房柱.蜂胶的研究与医药应用.连云港:科技出版社,1980,44.

[2] 沈胜利,王素文.天然蜂胶对口疮治疗的实验室与临床观察．中华口腔医学杂志,1986,(4):209.

[3]Sosnowski. Zenon M. Fxtracting propolis and watersoluble dry propolis powder. Chemical Abstracts 1983,99:321.