源诺如病毒(HuNoV)是全世界非细菌性肠胃炎的主要病因。HuNoV主要通过粪口途径感染,而鲜切的绿色蔬菜、草莓和西红柿等农产品及其果汁制品是最常见的、与诺如病毒(NoV)暴发有关的食品类别。鲜榨果(蔬)汁是指以新鲜水果或蔬菜为原料的现榨现饮,即不经任何的杀菌处理,供人们直接饮用的非定型包装饮料。
目前,HuNoV的灭活主要依靠加热、辐射、次氯酸钠和二氧化钛处理等传统的物理和化学方法,但是这些方法都会对食品的生物活性成分产生破坏,最终降低食品的营养和感官价值。
据报道,含有类黄酮、多糖和多酚的植物提取物,如石榴提取物、葡萄籽提取物和蔓越莓提取物,可以降低饮料中诺如病毒的感染性。一些天然化合物适合用作安全、健康的抗病毒添加剂。蜂胶是蜜蜂从各种植物中收集的树脂材料,并与蜡和其他物质混合,是一种天然的植物产物,也是常用的食品添加剂成分。
蜂胶主要由黄酮类、酚类、芳香酸类、酯类等多种化合物组成,在我国及一些东南亚国家,蜂胶常被添加到果蔬汁中以调节口感。据报道,蜂胶及其部分活性物质可以抑制脊髓灰质炎病毒(PV)、甲型和乙型流感病毒、呼肠孤病毒(RV)和艾滋病病毒(HIV)。尽管已有许多关于蜂胶药理活性的报道,但蜂胶对HuNoV的作用及其机制尚不清楚,关于其在果蔬汁中抗诺如病毒的应用也鲜有报道。
目前国际上已有许多关于HuNoV体外培养的探索,并取得了一系列的成果,但HuNoV体外培养体系还不完全稳定,无法被广泛运用;因此,对于抗诺如病毒药物效果的研究仍然需要通过可培养的HuNoV替代物来完成选取小鼠诺如病毒(murinenorovir-us-1,MNV-1)和噬菌体MS2作为HuNoV的替代物。MNV-1是一种可培育的诺如病毒,目前被认为是最合适的HuNoV替代物;而MS2在常规实验中培养简便、经济,感染性实验比其他替代方法更易进行。
为研究蜂胶提取物对人源诺如病毒的体外抑制作用,江西农业大学、浙江省疾病预防控制中心联合浙江中医药大学,采用小鼠诺如病毒和噬菌体MS2病毒为替代病毒,研究蜂胶水提物和醇提物随浓度及时间变化对小鼠诺如病毒和噬菌体MS2病毒的抑制作用及其机制。
浓度相关性实验表明:随着蜂胶醇提物浓度增加,小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度呈显著下降趋势,当醇提物质量浓度达到500μg/mL时,小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度分别下降了6.93lgPFU/mL和3.75lgPFU/mL。时间相关性实验表明:将质量浓度为250μg/mL蜂胶醇提物与小鼠诺如病毒和MS2病毒培养60min,前40min小鼠诺如病毒和MS2病毒滴度分别下降4.18lgPFU/mL和3.30lgPFU/mL,随后下降趋势减缓,在60min时,小鼠诺如病毒和MS2病毒的总滴度分别下降了4.48lgPFU/mL和3.67lgPFU/mL。
机制研究表明:蜂胶醇提物可能与宿主细胞(受体)结合,或直接与病毒颗粒结合,使病毒衣壳蛋白变性,阻止病毒进入宿主细胞;透射电镜图像进一步证实了蜂胶醇提物直接作用病毒导致其膨胀破裂。最后,经蜂胶醇提物处理后,人为污染病毒的蔬菜汁和果汁中病毒的滴度显著降低。
研究结果将有可能为果蔬在鲜榨过程中,挑选合适的添加剂提供更多的选择。蜂胶提取物也可用作农产品的天然添加剂,经过30min蜂胶提取物处理后,蔬菜汁和果汁的MNV-1和MS2滴度显著降低。蜂胶提取物可望作为一种天然的抗病毒添加剂应用于鲜切的蔬菜和果汁中。
(来源:蜂胶提取物对诺如病毒的体外抑制作用研究.食品科学技术学报,2021,39(2):40)
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