蜂胶在呼吸道疾病中的应用

呼吸道异常炎症可能会危及生命。几种疾病可能导致呼吸困难，但更常见的是，呼吸道对空气中的有毒污染物、香烟烟雾、刺激剂、过敏原和包括病毒在内的病原体具有高度反应性。持续的炎症反应可能是由于炎症部位的巨噬细胞清除受损、慢性感染、氧化应激或局部缺氧所致。所有这些刺激都会导致气道壁的组织重塑，并且肯定会损害血气屏障水平的气体交换。

炎症反应由中性粒细胞和上皮细胞之间的复杂相互作用触发，刺激免疫细胞募集到受伤部位。TNF-α和IL-8参与炎症的第一阶段，分别增加肺毛细血管内皮细胞上粘附分子的表达和吸引中性粒细胞。通常在呼吸道炎症过程中表达的其他炎症介质是MMP-9、粘附分子ICAM-1和VCAM-1、COX-2和胞质磷脂酶A2。特别是，金属蛋白酶会导致细胞外基质降解，可能导致肺气肿的发作，并且在哮喘期间由TGF-β调节的气道组织重塑过程中发挥重要作用。在以下段落中，将介绍证明蜂胶或其分离成分调节呼吸道免疫和炎症反应能力的研究。

凯亚尔等人进行了一项临床研究，以评估基于蜂胶的食品补充剂作为辅助剂对接受口服茶碱治疗的轻度至中度哮喘成人患者的有益效果。该配方含有在丹麦、中国、乌拉圭和巴西收集的蜂胶水提取物，并标准化为含有不少于0.05%的芳香酸（主要是咖啡酸、阿魏酸、异阿魏酸、肉桂酸和3,4-二甲氧基肉桂酸），此外还有微量的各种黄酮类化合物。治疗2个月后，接受蜂胶的患者夜间发作的发生率和严重程度显著降低（从平均每周2.5次减少到仅1次），并且通气功能有所改善。促炎细胞因子TNF-α、ICAM-1、IL-6和IL-8的血清水平分别下降了52%、65%、44%和30%，而IL-10增加了3倍。PGE2、PGF2α和LTD4分别显著降低到初始值的36%、39%和28%。

虽然不完全是一种呼吸系统疾病，但人体暴露于空气污染物的后果部分涉及呼吸道。索伊卡等人在拉布卡疗养区逗留期间对440名儿童进行了一项研究，这些儿童是莱格尼察（波兰）周围污染严重的地区的当地人。与当地儿童相比，发现急性期蛋白水平在铁蛋白和转铁蛋白血清水平方面存在显著差异。蜂胶处理显著改变了气候对红细胞沉降率、血清蛋白电泳分数和一些参与铁代谢的急性期蛋白的影响。

一些研究调查了各种蜂胶样品对与肺部感染有关的细菌病原体的影响。在大鼠内毒素诱导的急性肺部炎症模型中，口服蜂胶显著降低了氧化应激标志物丙二醛的水平，并恢复了超氧化物歧化酶的水平，增强了内源性抗氧化系统。德马尔科等人检测了意大利蜂胶水醇（85%乙醇）提取物对铜绿假单胞菌的抗菌活性，其特征是存在白杨素、高良姜素、松柏素和CAPE，一种机会性病原体，能够形成主要与慢性肺部感染相关的生物膜。提取物的最低抑菌浓度(MIC)测定为125µg/ml，具有抑菌作用。

此外，蜂胶能够减少生物膜的形成并减少生物膜中活的铜绿假单胞菌细胞的数量，这表明生物膜质量的减少是由于固着细菌数量的减少。特别是，蜂胶部分抑制了铜绿假单胞菌的游动活动和稳定粘附的形成，而对游动和抽搐活动没有观察到影响。

在腹腔注射耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的大鼠中评估口服红蜂胶水提取物对肺损伤的保护作用。蜂胶改善了氧化应激生物标志物丙二醛，以及抗氧化标志物谷胱甘肽过氧化物酶和超氧化物歧化酶。此外，蜂胶提取物可调节TNF-α和VEGF血清水平的变化，并改善肺部的氧化性DNA损伤和细胞凋亡生物标志物caspase-3。生化结果得到肺组织组织病理学观察的支持。

赛义德等人在腹膜内注射金黄色葡萄球菌之前，评估了蜂胶水醇（70%乙醇）和水提取物在大鼠中的口服和腹膜内给药60天。当在卡氏肺孢子虫感染的大鼠模型中评估口服蜂胶的效果时，发现该治疗在减少感染动物肺中的囊肿数量方面完全无效。然而，在细菌感染的情况下，蜂胶通常已被证明具有直接的抗菌活性以及抗炎和免疫调节作用，这似乎与对免疫系统构成挑战的情况特别相关，例如播散性感染和内毒素血症，并以系统性有害结果为特征。

巴罗佐等人检验了以下假设，即口服补充巴西蜂胶乙醇提取物可以修复因接触香烟烟雾引起的肺气肿肺损伤。C57BL/6小鼠暴露在香烟烟雾中60天，然后再用蜂胶处理60天。组织学分析显示蜂胶能够逆转隔膜和肺泡破坏，显著改善肺组织结构。此外，该提取物增加了MMP-2并降低了MMP-12的表达，从而增强了组织修复和白细胞募集的过程。

特别是，蜂胶促进巨噬细胞替代激活，增加IL-10水平并有利于抗炎微环境，同时以不依赖Nrf2的方式下调IGF1表达。Lopes等人评估了口服绿色巴西蜂胶乙醇提取物对香烟烟雾引起的急性肺部炎症的疗效。蜂胶处理减少了肺泡巨噬细胞和中性粒细胞的数量，并恢复了肺匀浆中的NO、丙二醛和髓过氧化物酶水平以及抗氧化酶活性。此外，TNF-α表达降低。

肺纤维化是一种由纤维化介质水平改变引起的疾病，是被称为间质性肺病的不同肺部疾病的最常见结果。比尔金等人研究了蜂胶口服给药在大鼠博莱霉素诱导的肺纤维化模型中的保护作用。蜂胶降低氧化应激标志物（丙二醛和髓过氧化物酶水平）并增加过氧化氢酶活性。虽然平均纤维化评分没有显著差异，但超微结构研究显示蜂胶比泼尼松龙更有效地减少肺纤维化。

伊斯梅尔和法拉格研究了蜂胶口服给药对雄性白化大鼠博莱霉素诱导的肺纤维化的保护作用。博来霉素治疗的动物谷胱甘肽水平显著降低，丙二醛水平升高，正常肺结构完全丧失（隔膜增厚、血管充血、炎症浸润和成纤维细胞数量增加），胶原纤维和α-SMA显著增加）、iNOS和细胞色素c免疫反应性。蜂胶处理的动物显示谷胱甘肽水平恢复，丙二醛显著减少，肺结构几乎正常，所有其他改变均有所改善。

Kao等人评估了巴西蜂胶水醇（70%乙醇）提取物对人肺泡上皮细胞中TGF-β1诱导的上皮-间质转化的抑制作用，这种情况被认为可能有助于纤维化肺病和严重哮喘的气道重塑。用蜂胶预处理然后用TGF-β1处理的A549细胞保留了上皮细胞形态，减少了N-钙粘蛋白和ROS的产生，并显示出运动性降低。特别是，蜂胶阻止了TGF-β1诱导的PPARγ蛋白下调，这表明蜂胶提取物的抗纤维化作用可能至少部分是由PPARγ激活介导的。CAPE和松松素对TGF-β1诱导的A549细胞形态变化没有抑制作用，但对上皮间质转化只有部分作用，总而言之，这些研究结果表明蜂胶在病理条件下的有益作用，这些病理条件涉及肺组织平衡的破坏、组织结构的丧失和纤维化的发生，例如病毒或细菌呼吸道感染的后果，这些感染会导致免疫反应过度。

El-Aidy等人的研究旨在检查腹腔内给予埃及蜂胶乙醇和水提取物对CD1小鼠伴清蛋白诱导哮喘模型肺部炎症的调节作用。在用蜂胶处理的小鼠中，循环和肺浸润的嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的百分比显著降低。此外，肺部的组织病理学检查显示炎症评分显著降低，表明对哮喘有相当大的改善作用。有研究台湾蜂胶水提取物在BALB/c小鼠卵清蛋白诱导的哮喘模型中的免疫调节和抗炎活性。蜂胶口服给药可有效抑制致敏小鼠的血清卵清蛋白特异性IgE和IgG1水平以及气道高反应性。尽管在支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞的浓度或嗜酸性粒细胞数量没有显著差异，但较高剂量的蜂胶可以降低IL-5水平。

此外，与对照组相比，蜂胶处理小鼠的卵白蛋白刺激脾细胞中细胞因子（IFN-γ、IL-6和IL-10）的分泌显著降低。在受到过敏原攻击的C57BL/6小鼠中研究了标准化的绿色蜂胶提取物(EPP-AF®)。该提取物的特征是存在大量青蒿素C、4,5-二咖啡酰奎尼酸、3,5-二咖啡酰奎尼酸和对香豆酸。蜂胶处理降低了支气管肺泡灌洗液中的总细胞数和IL-5水平，以及肺组织中的IL-13水平，证实了Th2炎症的减弱。治疗小鼠肺部的M2巨噬细胞数量也减少了。此外，蜂胶增强了多形核髓源性抑制因子的频率，这可以诱导Treg分化。因此，CD4+Foxp3+的频率和总数增加可以观察到Treg细胞。有趣的是，这种作用可以直接由蜂胶在体外分离的T细胞上引起。188蜂胶在哮喘和过敏模型中有效性的临床前证据证实了在上述临床研究中获得的结果。

胡等人9探讨了中国杨树蜂胶水醇（80%乙醇）和水提取物在角叉菜胶诱导的大鼠胸膜炎和LPS诱导的急性肺损伤模型中的抗炎作用。两种提取物对角叉菜胶诱导的胸膜炎中的胸腔积液、白细胞计数以及NO和PGE2水平都有显著影响。蜂胶在急性损伤模型中抑制肺水肿，但结果不显著。此外，水醇提取物显示出良好的抵抗肺中中性粒细胞增加和淋巴细胞减少的能力。在Wistar大鼠油酸和LPS注射诱导的肺损伤模型中，蜂胶乙醇和水提取物拮抗肺水肿，减少炎症，抑制NF-κBp65亚基的表达和活化。

Borrelli等人研究了在大鼠角叉菜胶诱导的胸膜炎模型中腹膜内施用意大利蜂胶乙醇提取物并剥夺CAPE、高良姜素和CAPE的作用。用蜂胶本身和CAPE治疗产生渗出液量的显著剂量依赖性减少和白细胞迁移到胸膜腔的抑制。另一方面，高良姜素和剥夺CAPE的提取物完全无效。这些发现直接需要蜂胶的抗炎特性，并再次证明，只要存在，CAPE似乎是这种效果的主要决定因素。

鼻黏膜的机械性损伤，尤其是在慢性鼻窦炎之后，可能会导致过度结痂并最终导致粘连，这种情况的特征是鼻甲或鼻甲与侧壁/隔膜之间的粘连。蜂胶口服给药旨在治愈Wistar大鼠受伤的鼻粘膜，降低炎症程度，防止纤毛细胞和杯状细胞丢失，保持组织的组织学完整性。

Sobočanec等人评估了富含白杨素、松柏素和高良姜素的蜂胶膳食补充剂对高氧CBA/Hr小鼠的预防作用。尽管在体外具有相对较低的抗氧化能力，但蜂胶在体内被证明是一种强抗氧化剂。由于成年动物的肺由于无法快速增强抗氧化防御能力而容易受到高氧的影响，因此氧化应激显著增加了脂质过氧化副产物的水平。由于锰依赖性超氧化物歧化酶和过氧化氢酶活性的增强，蜂胶消除了这种增加。总之，这些结果表明在长期氧疗的情况下利用蜂胶强抗氧化和清除能力的可能性。

最后，罗西等人研究了以高CAPE含量(10.44%)为特征的意大利蜂胶乙醇提取物本身的作用，并分离了CAPE，以及一些分离的化合物(CAPE、高良姜素、松柏素、咖啡酸、绿原酸、阿魏酸和肉桂酸)在抑制肺环氧合酶活性中的作用。蜂胶本身(0.3–300µg/ml)、CAPE(0.1–100µM)和高良姜素(1–100µM)以浓度依赖性方式显著抑制大鼠肺环氧合酶的前列腺素生成，无论是否诱导LPS。分离CAPE的提取物的效力降低了大约10倍。这些结果表明，CAPE和高良姜素都有助于蜂胶的整体抑制活性。然而，CAPE是主要贡献者，因为蜂胶本身和CAPE的抑制曲线几乎是重叠的。

尽管仅进行了少数临床研究来评估蜂胶对呼吸道疾病（即病毒性上呼吸道感染、哮喘和与污染相关的炎症状态）的功效，但大量的临床前研究，主要是在体内，证据表明这种有益效果在这种病理情况下的天然产物。蜂胶已证明其对细菌感染的功效，显示出直接的抗菌活性，而且还具有更有趣的免疫调节和抗炎作用，可以保护肺组织结构和功能。类似的效果也在其他不同的呼吸系统疾病模型中得到证实，例如与烟雾相关的肺气肿、纤维化、哮喘以及胸膜炎和一般性肺损伤，概述了广谱治疗剂的作用概况。

（来源：The antiviral and immunomodulatory activities of propolis: An update and future perspectives for respiratory diseases，02 November 2021 https://doi.org/10.1002/med.21866）