蜂胶的安全性-急性毒性试验

蜂胶的利用历史可以追溯到远古希腊，在 12～15 世纪的医学专著中就有蜂胶作为口腔内消炎剂、虫牙镇痛剂的记载，其后蜂 的进一步演化研究也以欧洲作为中心。在日本，受 1985 年名古屋召开的第 30 届国际养蜂会议影响，蜂胶作为保健食品原料的需求快速增长。日本蜂胶协议会积极地开展关于蜂胶成分、功效以及安全性方面的资料收集、分析研究等 ，就恰当的销售、使用方法等指导行业，努力育成健全的蜂胶市场。关于蜂胶的安全性，许多蜂胶的论述和 报告中阐述简单，新奇的实验报告很少，非常有必要考虑蜂胶安全性的基础研究。因此，委托日本食品分析中心作蜂胶急性毒性试验。另外，德岛文理大学药学部也愿意研究蜂胶的过敏问题以及蜂胶制剂的生物活性问题。现将蜂胶急性毒性试验结果报告如下 ：

一、蜂胶概述

蜂胶是蜜蜂从植物，特别是从树木幼芽采集来的树脂，并混入自身分泌蜂蜡作成的树脂状物质。蜜蜂用蜂胶加固蜂巢、修补蜂箱掩埋入侵死亡昆虫和小动物尸体等，也用于蜂王产卵前巢房的涂层上光。蜂胶的成分复杂，由多种多样的有机化合物组成。主要成分有黄酮类化合物、有机 酸、酚酸类、芳香醇以及酯类。还含有维生素和矿物质等。蜂胶中这些化学成分与蜂场附近的树木分泌液成分类同。

二、蜂胶的作用

蜂胶在蜂巢内是一种防腐剂，有抗菌性。在欧洲和中国，蜂胶作为蜂产品用在医疗中，主要是镇痛剂和消炎剂。蜂胶对人体主要有抗菌、镇痛和消炎作用。日本国立预防卫生研究所的松野哲也博士，用蜂胶治疗子宫癌，并提出蜂胶中有3 种 特殊杀癌细胞物质。

三、蜂胶的安全性

1 、毒性试验

Donadieu(1987)在“蜂胶自然疗法”中有这样的论述：蜂胶(1kg 体重用 10～15g) 经口施喂给狗、大白鼠、土拨鼠 ，服用数月没有发生任何毒性和病理上的问题。他认为完全没有毒性，但只有经口施喂多少的试验结果，没有其它详细的原始数据文献记载。

2 、癌原性

蜂胶经动物试验没有致癌性，相反在一定条件下，有融解肿瘤细胞的性质 ，即认为有抑制肿瘤形成的作用。松野博士在治疗子宫癌的实例中，认定蜂胶中有杀癌细胞的特殊成分。

3 、过敏性

养蜂者很早就知道蜂胶有过敏性，发生率 0.05 % 。关于这个问题，通过蜂胶成分和植物成分的比较，认为导致过敏性的这种接触性抗原是从植物中来的。过敏与体质、药物的接触和服用剂量、方法以及服用次数等复杂原因有关。蜂胶发生过敏只是少数人，不必担心蜂胶有特别危险的过敏物质，并且德岛文理大学正在研究蜂胶过敏问题。

四、急性毒性试验的样品

日本进口的蜂胶主要产地是巴西和中国。这些产地不同的蜂胶，其黄酮类、酯类和其它成分的构成比例不同。此次试验所用样品是有代表性的巴西产蜂胶和中国产蜂胶两个品种。蜂胶急性毒性试验，选择国内普遍应用的乙醇提取浸膏。蜂胶浸膏不溶于水，浮在表面难以分散，有必要考虑除去乙醇。在那里将乙醇提取液用糊精吸附、干燥，然后再将其粉碎成粉末状。证明蜂胶的毒性低，试验样品浸膏中固形物成分含量就要高些。高浓度蜂胶试验样品的调制，利用阿鼻株式会社综合研究所配制的 50 %浸膏固形物含量粉末样品。乙醇浸膏样品中蜂胶含量与原蜂胶量的换算系数是：巴西产 0.9 ，中国产 0.65 。如中国蜂胶样品 1g ， 50 %浸膏相当于 0.5g 浸膏固形物含量，相当于 0.65g 蜂胶原料。这个换算系数作为安全性数据使用，是参考提取率数据中最高值设定的。

五、急性毒性试验的实验方法

1 、委托试验单位和实验单位试验单位：日本食品分析中心。实验单位：日本科学饲料协会和科学饲料研究中心。

2 、样品：中国产蜂胶提取物( CP) 和巴西 产蜂胶提取物 (BP) 。

3 、施喂途径：经口服用。

4 、试验动物：日本医学动物材料研究所株式会社繁殖的 ddr- N 系雌雄小鼠。约 4 周龄时引进，预备饲养 1 周，确认健康状态等无异常情况后(约 5 周龄)供试验用。

5、试验室温 ：24 ±4 ℃。

6、试验时间 ：BP1993 年 3 月 3 日～17 日 ，CP 1993 年 3 月 4 日～18 日。

7、样品溶液调制方法：用胃导管经口施喂调制的悬浊液。悬浊液调制时将样品加热到 70 ℃左右，然后加入 20 %的吐温 80，待恢复至室温用磁力搅拌器搅拌均匀，制成 11.6 % 、13. 9 %. 16. 7 %和 20. 0 % ( W/ V) 4 个浓度。

8 、样品溶液施喂方法。

a 、施喂方法：供试小鼠在施喂前 1 天的下午 5 点开始，到施喂当天上午10 点 ，约断食 17 小时后用胃导管强制性经口 1 次施喂样液。施喂样液时，先用玻璃棒搅拌至均。

b 、样品施喂量：小鼠 1kg 体重 20ml 样液。样品最高施喂量 4000mg/ kg ，以下还有 3340mg/ kg 、2780mk/ kg 、2320mg/ kg 共 4 个标 准 (公比 1. 2) 。浸膏和蜂胶相当量见表 1 。

表 1  施喂标准和相当量 (单位 ：mg/ kg)

C 、每组试验动物数：样品试验组雌雄小鼠各 5 只。

d 、中毒症状和死亡情况观察：施喂后连续 5 小时观察中毒症状，然后在施7 小时和 24 小时继续观察，以后间隔 24 小时观察 2 周。

e 、体重测定： 施喂后、施喂后 3 天、7 天 和 14 天分别测定小鼠体重。

f 、LD50 值计算方法 ：概率统计法。

六、急性毒性试验的结果

1 、LD50 值：急性毒性 LD50 值试验结果，不论多少施喂量没有见到死亡例(14 天观察) 。

2 、中毒症状。

a 、巴西产蜂胶：2780mg/ kg 以上的试验组 ，样品施喂后约 10 分钟 ，雌雄个体活力均稍微下降。施喂后 30 ～60 分钟，2320mg/ kg 试验组全部活力稍微下降。但是，不论哪一组，施喂后 3～4 小时活力恢复正常。并且，施喂后 4小时观察到，大致全部排泄褐色泥状便以及伴有排泄肛门周围湿润等被毛污染状。所有以上症状在施喂后约 20～24 小时消失，以后观察未见异常现象，也没有死亡例发生。

b 、中国产蜂胶：不论哪一个试验组 ，样品施喂后全部活力稍微下降，3～ 4 小时恢复正常。施喂后 4 小时，每组 2～4 例排泄褐色泥状便，并伴有排泄时肛门周围湿润等被毛污染状。所有症状在施喂后约 20～24 小时消失 ，以后观察未见异常现象，也没有死亡例发生。

3 、解剖检查：全部供试小鼠实验结束时杀死，肉眼解剖观查，不论哪一个试验组，雌雄小鼠主要脏器等未见异常。

4 、体重变化(各施喂标准平均值)： 供试小鼠体重和样品添加施喂量间没有一定的关系，均显示正常发育。供试小鼠体重变化情况见表 2 - 1 、表 2 - 2 (略) 。

七、急性毒性试验结果讨论

巴西产蜂胶和中国产蜂胶两样品施喂后，活力稍微下降和排泄褐色泥状便，并分别于施喂后 4 小时和 24 小时症状消失，以后未见异常及死亡发生，并且体重均逐渐增加。从以上结果可以看出，样品经口 LD50 值推断是 3600mg/ kg 以上。这个 LD50 值相当于浸膏固形物和蜂胶原料量见表 3 。

表 3   浸膏和蜂胶的 LD50

蜂胶作为健康食品原料的摄入量，多半日服 1000mg浸膏以下，医疗用每日可达数 mg 。按日服 1000mg 计算， 50kg 体重服用量为20mg/ kg 以下，不到经口 LD50 值的 1 % 。

结论 ，蜂胶作为食品原料是安全的。

本文摘自《养蜂科技》     1999 年第 3 期