蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病预防作用的实验研究

摘要:目的 探索蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病的预防作用。方法 以清洁级CD-1雄性小鼠120只为研究对象,采取分层随机区组方法分组,用不同剂量的蜂胶灌胃,用链脲佐菌素80mg/kg腹腔注射造模,分别测定血糖和体重的变化,所得数据采用SPSS10.0软件包进行统计分析。结果 实验组与对照组血糖和体重的组内差别和组间差别及各组间糖尿病罹患率的差别有高度统计学意义(P<0.01)。

结论 蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病具有预防作用,可以作为临床研究的实验参考。

关键词:蜂胶;糖尿病;预防;实验中图分类号:R-332文献标识码:B

我国目前约有糖尿病患者5000万人,并呈逐年上升趋势,预计到2010年,我国糖尿病的发病率可能高达11%[1],由于尚无有效的防治措施,因此,寻求一种对人体安全有效的预防手段便成为糖尿病防治研究的当务之急和发展趋势。本课题的研究目标旨在论证不含其他药物成份的蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病的预防作用,并分析产生预防作用的每日最低摄入剂量和最短使用时间,为探讨蜂胶预防人类糖尿病提供实验依据。

1、材料与方法

1.1实验动物

以中南大学实验动物学部提供的清洁级CD-1雄性昆明小鼠为实验对象,每只体重为(20±3)g,实验动物许可证号为scxk(湘)2006-0002,动物专用饲料质量合格证为scxk(湘)2005-004。

1.2 实验药品

蜂胶软胶囊为湖南明园蜂业提供不含其他药物成份的纯蜂胶制剂,执行标准为Q/GX0021-2001,批准文号为长天卫许证字(99)第0521号;小鼠糖尿病造模药品链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)为美国Sigma公司产品,血糖测定采用GF-D800血糖测定仪,试剂均为国产分析纯。

1.3实验方法

采取分层随机区组方法分组,将每窝雄性小鼠随机分为4组,每组15只,各组除处理因素不同外,其他饲养条件完全一致。实验前分别观察各组空腹血糖和体重,空白对照组用植物油50mg/100g灌胃,以人体推荐剂量每天50mg/kg体重为低剂量组、中剂量蜂胶组用蜂胶250mg/100g、高剂量蜂胶组用蜂胶500mg/100g灌胃,每天一次,第一期实验灌胃时间为2星期,第二期实验灌胃时间为1星期,实验后均用链脲佐菌素80mg/kg腹腔注射造模,造模2d后禁食不禁水12h,分别测定血糖和体重,若空腹血糖>7.0mmol/L则初筛为罹患糖尿病[2]。

1.4统计学处理

采用SPSS10.0软件包进行统计分析,分别比较实验组与对照组血糖和体重的组内差别和组间差别及各组间糖尿病罹患率的差别。

2、结果

2.第一期实验前后各组空腹血糖测定。结果见表。

表1  第一期实验前后各组小鼠空腹血糖测定( x±s,mmol/L)

2.2第一期实验前后各组空腹体重测定。结果见表2。

表2 第一期实验前后各组小鼠空腹体重测定( x±s,g)

2.3第一期实验后各组间糖尿病罹患率的比较。结果见表3。

表3第一期实验后各组间糖尿病罹患率的比较(只)

2.4第二期实验前后各组空腹血糖测定。结果见表4

表4第二期实验前后各组小鼠空腹血糖测定( x±2S,mmol/L>)

2.5第二期实验前后各组空腹体重测定。结果见表5。

表5第二期实验前后各组小鼠空腹体重测定( x±2S,g >)

2.6第二期实验后各组间糖尿病罹患率的比较。结果见表6。

表6第二期实验后各组间糖尿病罹患率的比较(只)

2.7血糖测定指标性能评价

经随机抽一样品重复测定10次,变异系数CV为4.41%,回收试验测得回收率R为92.6%,偏差系数CB为6.7%,分析系数CA为86%,说明该指标性能可靠,符合诊断和科研的相关要求。

3、讨论

糖尿病(Diabetesmellitus,DM)是因胰岛素绝对或相对不足而引起的体内糖、蛋白质、脂质代谢紊乱的一种疾病,目前尚无有效的防治措施,已成为人类健康和生命的主要威胁之一[3]。蜂胶(Propolis)是工蜂从植物的枝芽、树皮等部位采集的树脂,再混以舌腺、蜡腺等腺体的分泌物加工而成的一种胶状物质。按人体推荐剂量每天50mg/kg体重的25～100倍进行毒理学试验,每天给小鼠灌胃1次,连续观察30d,未见毒副作用和致突变性,符合食用安全要求[4]。蜂胶中所含黄酮类化合物,特别是水飞蓟素,能清除自由基、稳定细胞膜,对胰岛损伤起保护作用,可降低丙二醛(MDA)水平,阻止血糖的持续升高[5,6]。据检索,国内外目前对蜂胶与糖尿病的研究报道,都属于糖尿病治疗方面的研究,但关于蜂胶对糖尿病的预防作用,未见系统的实验研究,而蜂胶制剂属于食品与保健食品不在国家药典收录的药品之列,根据国家有关法规,食品与保健食品是不能宣传或暗示有治疗作用的。

本研究,采用不含其他药物成份的蜂胶软胶囊为研究因素,研究高、中、低剂量的蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病的预防作用。实验前各组间体重、血糖经单因素方差分析(ANOVA),P>0.2,符合均衡对照原则。一期研究结果表明,在采用蜂胶软胶囊灌胃2星期后,各组小鼠间空腹血糖、体重等指标的差别均具有高度统计学意义,实验组与对照组间体重、血糖、糖尿病罹患率等指标差别均具有统计学意义,各实验组糖尿病罹患率比较,仅A组与D组间差别均具有统计学意义,各组实验前后体重等指标经自身配对t检验,差别均具有统计学意义,各组空腹血糖指标实验前后配对比较t检验,A组P<0.01,B组P<0.01,C组P<0.05,说明高、中、低剂量的蜂胶软胶囊对小鼠糖尿病均产生了预防作用,并具有一定的抑制肥胖的作用。二期研究结果表明,在采用蜂胶软胶囊灌胃1星期后,实验组仅C组、D组与对照组间血糖、糖尿病罹患率等指标差别均具有统计学意义,各组实验前后空腹血糖、体重等指标经自身配对t检验,差别均具有统计学意义,说明高、中剂量组才能在短时间内产生预防糖尿病的作用,但抑制肥胖的作用不明显。由此可见,按人体推荐剂量每天50mg/kg体重应用蜂胶软胶囊预防糖尿病,在小鼠实验中需要2星期才能观察到预防效应,按相应寿命推算,相当于人体应用约6个月[7],每日摄入剂量越大,预防效应越强。

糖尿病是湖南省重点防治的慢性非传染性疾病,由于糖尿病是中老年人的常见病之一,且尚无有效的防治措施,且治疗药品需长期使用,对人体毒副作用较大,因此,寻求一种对人体安全有效的预防手段便成为糖尿病防治研究的当务之急和发展趋势。而糖尿病患者中约80%属于中高收入阶层,有较强的消费能力,因此,本课题研究成果的推广应用,对于进入老年化社会的中国有望产生较高的经济效益和社会效益。

[参考文献]

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[4] 傅剑云,郑云燕,陈玉满,等.一种蜂胶保健食品的安全性研究[J].卫生毒理学杂志,2004,18(3):203-204.

[5] 胡福良,玄红专,陈民利,等.蜂胶对糖尿病SD小鼠的影响[J].浙江大学学报(农业与生命科学版),2004,30(2):205-209.

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[7] 方喜业.医学实验动物学[M].北京:人民卫生出版社,1995.10:106

魏高文1,冯务群1,夏晓凯1,袁石芳1,欧阳翌国1,张斌1,喻祖文1,刘家银2,朱劲松