蜂胶对小鼠移植瘤细胞株生长的抑制作用的形态学观察

【摘要】目的 :探讨蜂胶对小鼠移植瘤 (S₁₈₀)生长的抑制作用。方法 :用不同浓度的蜂胶饲料分组喂养小鼠2月后 ,在其腋下接种肿瘤细胞株 (S₁₈₀) ,8天后 ,手术取出肿瘤组织称重 ,石蜡切片 ,HE染色 ,显微镜下观察形态学变化并在高倍镜下计数肿瘤细胞核分裂像。结果 :蜂胶实验组小鼠移植瘤重量较对照组显著减轻 (P<0.01) ,肿瘤生长抑制率B组为45.7% ,C组为66.0% ,D组为64.4 %。实验组肿瘤组织内核分裂像较对照组显著减少 (P<0.01) ,肿瘤组织周围淋巴细胞呈反应性增生。结论 :适量蜂胶饲养小鼠 ,对其移植瘤细胞株的生长有抑制作用。

【作者】 郭文君  韩连堂  王春梅  王志萍  魏志新  高建华  邱玉刚  李新伟

【关键词】蜂胶 小鼠 肿瘤细胞株 形态学

蜂胶是蜜蜂从多种树木芽上采集的一种天然树脂状物质 ,具有抗衰老、抗氧化、增强机体免疫力等作用^[1]。蜂胶对肿瘤细胞的生长是否有影响 ,尚未见文献报道。笔者用不同浓度蜂胶拌食喂养小鼠 ,2个月后接种肉瘤细胞株S₁₈₀,进行实验观察 ,以探讨蜂胶对移植性肿瘤细胞生长的影响。

１材料和方法

1.1 实验动物:昆明种小鼠80只 ,♀♂各半 ,体重 (20±2) g,由潍坊医学院动物中心提供。

1.2 动物分组:将动物分为A、B、C、D４组 ,每组20只 ,其中Ａ组为对照组 ,B、C、D组为蜂胶实验组。蜂胶购自山东临朐农场养蜂基地。将蜂胶冷冻粉碎为粉末 ,分别用0%、1.5 %、2.0 %、2.5%４种不同蜂胶浓度饲料喂养小鼠 ,自由进食和饮水。2个月后 ,在小鼠右侧腋窝皮下注射接种１×10⁶(0.2ｍl)移植性肿瘤S₁₈₀细胞株 (肿瘤细胞株由山东预防医学科学院药理研究所提供 ) ,接种瘤细胞８天后脱臼处死小鼠 ,做病理学检测。

1.3 组织处理 :手术取出移植瘤体组织 ,称重后放入10%福尔马林固定 ,丙酮逐级脱水 ,石蜡包埋 ,切片 ,HE染色 ,光镜观察 ,每例肿瘤组织切片随机取10个高倍镜视野 (HPF)计数肿瘤细胞核分裂数目 ,按以下公式计算肿瘤抑制率 :肿瘤抑制率＝C-T/C×100% (T指试验组平均瘤重 ,C指对照组平均瘤重 )。最后 ,在LX586微机上 ,以SPSS/PC软件包进行统计学分析。

２ 结果

2.1 巨检 :肿瘤组织呈灰白色 ,边界清晰 ,无包膜 ,切面亦为灰白色。外观无明显差别。各组重量比较见表１。

由表１看出 ,蜂胶实验各组瘤体重量显著轻于对照组 (p＜0.01) ,肿瘤生长抑制率B组为45.7% ,Ｃ组为66.0% ,Ｄ组为64.4%。

2.2 镜检 :Ａ组肿瘤细胞呈巢状、片状分布 ,核大深染 ,异型性大 ,核分裂像多见 ,平均 (7.46±2.07)/HPF,间质血管丰富 ,肿瘤侵及周围脂肪、横纹肌及神经组织。肿瘤组织中可见灶状坏死 ,肿瘤细胞侵及血管 ,可见血管内瘤栓形成 ,肿瘤间质及边缘有少许淋巴细胞浸润。B、C、D组瘤组织呈巢状、小片状分布 ,侵犯脂肪及横纹肌现象仍存在。肿瘤组织坏死面积扩大 ,呈分隔状、小梁状及片状坏死 ,部分肿瘤细胞核固缩 ,排列疏松。肿瘤间质及边缘有中等量至大量淋巴细胞浸润 ,肿瘤细胞核分裂像明显减少 (见表２)。肿瘤组织边缘可见纤维性包裹 ,使肿瘤局限化 ,且未见瘤栓形成。

3 讨论

蜂胶是一种纯有机物质 ,由蜜蜂从树木芽上采集得来 ,蜜蜂在蜂巢这个天然实验室里对其进行提炼 ,用于保护蜂巢。蜂胶为含有苯甲酸 (及其酯 )取代的酚酸和酯、萜类及黄酮苷元等多种化合物的复杂混合物^[1]。为进一步证明其抗肿瘤效果并探讨其抑制肿瘤生长的作用机制 ,笔者在通过正交实验取得肯定结果的基础上 ,筛选确定有效试验剂量和敏感肿瘤细胞株 ,以S₁₈₀肉瘤为试验对象 ,观察蜂胶对小鼠体内移植性肿瘤生长的抑制作用。结果显示 ,实验动物连续食用含一定比例蜂胶(1.5%～2.5% )的食物2个月后 ,对体内移植性肿瘤生长产生抑制作用 ,主要表现为瘤体生长速度减慢 ,瘤体重量减轻 ;肿瘤细胞核分裂数目明显减少 ;肿瘤组织周围淋巴细胞反应增强 ,并有纤维性包裹 ,显示有限制肿瘤生长的迹象。经统计学分析 ,３个不同剂量实验组的肿瘤生长抑制率分别为45.7%、66.0%、64.4% ,均达到有效抑制范围 (＞30% )。以上结果表明 ,一定剂量的蜂胶对S₁₈₀小鼠移植性肿瘤的生长有显著抑制作用。这一结果进一步支持和证实了蜂胶治疗肿瘤的有关临床观察结果及结论^[2～5]。目前 ,关于蜂胶对肿瘤生长抑制作用的机制尚不清楚 ,根据本文及其它相关研究结果分析 ,初步认为可能的机制是 :(１)蜂胶抑制肿瘤生长主要是影响肿瘤细胞内的遗传物质 ,减缓细胞的有丝分裂速度 ,但具体环节尚需进一步深入探讨 ;(２)蜂胶可增强机体的整体免疫能力 ,通过提高肿瘤周围淋巴细胞活性而抑制肿瘤的生长 ;(３)结合本研究中其它抗突变试验结果 (另文 )分析 ,蜂胶可能通过直接作用于肿瘤细胞内已突变的染色体和基因的分裂复制过程或抑制正常染色体和基因的突变 ,从而产生抑制肿瘤生长的作用。

参考文献：

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[2]AmouasM 黄酮和黄酮醇对细胞培养的HSV -1的抑制协同作用并与蜂胶对病毒的抑制作用比较[J]国外医学-植物药分册,1993,5:210

[3]吴绪良蜂毒疗法简介[J]国外医学-中医中药分册,1998,20(3):61

[4]SakamotoS 蜂胶对7,12二甲基苯丙蒽所致皮肤肿瘤及荷瘤小鼠寿命的影响[J]国外医学-中医中药分册,1995,17(5):21

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